نکات فنی استفاده از تیشو فلوت
از تیشو فلوت برای از بین بردن چین و چروک برش های پارافینی بافت بعد از برش بلوک پارافینی بافت توسط میکروتوم استفاده می شود. به این منظور پس از این که برش های بافت توسط میکروتوم تهیه شد، این برش ها بر روی سطح آب گرم تیشو فلوت شناور می شوند به این ترتیب چین و چروک برش های بافت به واسطه باز و پهن شدن برش ها روی سطح آب گرم تیشو فلوت از بین می روند. به صورت خلاصه تیشو فلوت دستگاهی است که دارای یک ظرف آب است که آب درون آن توسط هیتر (گرم کن) تیشو فلوت گرم می شود. از تیشو فلوت برای شناورسازی و صاف کردن برش های نازک بافت (که با میکروتوم تهیه شدهاند) روی سطح آب گرم استفاده می شود، تا بتوان آنها را به صورت منظم روی لام شیشه ای منتقل کرد.
نحوه عملکرد تیشو فلوت:
• برش بافت: ابتدا نمونه بافتی در پارافین قالب گیری شده و سپس با میکروتوم به برش های بسیار نازک (معمولاً ۳ تا ۵ میکرون) بریده می شود.
• انتقال به تیشو فلوت: این برش های نازک روی سطح آب گرم (حدود ۴۰ الی ۴۵ درجه سانتیگراد) تیشو فلوت شناور میشوند.
• صاف شدن برش های بافت: گرمای ملایم آب تیشو فلوت باعث میشود تا چین و چروک های بافت از بین بروند و مقطع آنها کاملاً صاف شود.
• انتقال به روی لام: در نهایت لام شیشهای از زیر سطح آب تیشو فلوت عبور داده میشود تا برش های بافت صاف شده روی آن بنشیند.
کاربردهای تیشو فلوت:
• در آماده سازی لام های بافت شناسی برای بررسی زیر میکروسکوپ
• در آزمایشگاه های پاتولوژی
• برای بهبود کیفیت مقاطع بافتی قبل از رنگآ میزی
نکات مهم حین استفاده از تیشو فلوت:
• دمای آب تیشو فلوت باید چند درجه پایین تر از نقطه ذوب پارافین باشد (حدود 40 الی 45 درجه سانتیگراد)
• اگر آب تیشو فلوت بیش از حد گرم باشد، بافت ها ممکن است تخریب شود.
• آب تیشو فلوت باید کاملاً تمیز و در صورت لزوم با مواد ضد قارچ یا ضد باکتری نگهداری شود.
• اطمینان حاصل کنید قبل از استفاده از تیشو فلوت، آب تیشو فلوت تمیز باشد و دمای آن مناسب بافت و نوع برش تنظیم شده باشد.
• برشها را با دقت درون آب تیشو فلوت قرار دهید تا به آرامی باز شوند و سپس با لام برداشته شوند (لامی که قرار است برش روی آن چسبانده شود).
• دستگاه تیشو فلوت دارای المنت گرم کننده است، مراقب باشید که دمای آب خیلی زیاد نباشد تا به بافت آسیب بزند یا پارافین ذوب شود.
• پس از استفاده از تیشو فلوت، دستگاه و ظرف آب آن را تمیز نمایید تا رسوب یا آلودگی باعث کاهش کیفیت کار نشود.
• می توان با هدف کاهش کشش سطحی آب حجم مناسبی از الکل 95٪ را به آب تیشو فلوت اضافه نمود. این کار روند از بین رفتن چین و چروک های برش های پارفینی بافت را تسریع می بخشد.
• ممکن است لازم باشد دمای آب تیشو فلوت برای بافت های چربی مانند سینه یا مغز کاهش یابد.
• در برخی موارد لازم است که مقداری ماده چسبنده مناسب مانند آلبومین به آب تیشو فلوت اضافه شود تا به چسبندگی برش های پارافینی بافت به سطح لام کمک کند.
• تعویض روزانه آب تیشو فلوت موجب بهبود کیفیت کار و جلوگیری از انتقال آلودگی از یک نمونه به نمونه های دیگر می گردد.
• ظرف آب تیشو فلوت باید هر روز تمیز شود و در صورت نیاز پارافین رسوب کرده در ظرف آب تیشو فلوت با الکل و یا شوینده مناسب پاک شود.
• برای جلوگیری از آلوده شدن برش های پارافینی بافت یک نمونه به نمونه دیگر، سطح آب باید با دستمال یا کاغذ مناسب به صورت مرتب تمیز گردد.
• اگر دمای آب تیشو فلوت خیلی پایین باشد، چین و چروک های برش های پارافینی بافت از بین نمی رود.
اگر دمای آب تیشو فلوت خیلی بالا باشد، ممکن است پارافین را ذوب کرده و مورفولوژی بافت را تغییر دهد.
• دمای آب تیشو فلوت می بایست درمحدوده 40 الی 50 درجه سانتیگراد (5 تا 10 درجه سانتیگراد زیر نقطه ذوب پارافین) تنظیم شده و تلاش گردد دمای آب تیشو فلوت در همین محدوده حفظ گردد. این محدوده دمایی بهینه برای انواع مختلف پارافین است.
