توضیحات
محلول رایت گیمسا (محلول آزور، ائوزین، بافر در متانول)
از محلول رایت گیمسا جهت رنگ آمیزی لام های خونی و نمونه های مغز استخوان و برش های بافت پارافینی می باشد.
محلول رایت گیمسا از رنگهای هماتولوژی است. کاربرد زیادی در آزمایشگاه تشخیص طبی دارد. برای تشخیص بیماری و نشان دادن ساختار درون سلولی کمک کننده است. از طریق ساختارهای اسیدی و بازی موجود در رنگ به ساختارها وصل می شود. سپس سبب رنگ شدن آنها می شود. دقت این رنگ تا حد زیادی به دقت و تجربه ی پرسنل و عوامل محدود کننده زیادی نیز در دقت و وضوح آن وابسته است.
ساختار محلول رایت گیمسا
به رنگ رایت گیمسا رنگ رومانوفسکی هم گفته می شود. این رنگ از رنگ اسیدی و بازی تشکیل شده است و به منظور رنگ آمیزی ساختارهای درون سلول به رنگهای مختلف و تشخیص آنها از یکدیگر می باشد.
ساختار رنگ گیمسا حاوی رنگ ائوزین Y، آروز B و متیلن بلو یا آبی متیلن، رنگ بازی می باشد. رنگ رایت در فرمول خود علاوه بر رنگهای گفته شده متانول نیز دارد. متانول نقش فیکس کننده را دارد. این رنگ در آزمایشگاه تشخیص طبی کاربر دارد. چگونگی عملکرد این رنگ بدین گونه است که ساختار اسیدی آن به اجزای بازی سلولها (مانند سیتوپلاسم، گرانول ها) وصل می شود و آنها را به رنگ قرمز در می آید، بخش بازی این رنگ نیز به ساختار اسیدی (مانند هسته) متصل می شود و آنها را به رنگ بنفش در می آورد.
امروزه رنگ رایت گیمسا در آزمایشگاههای تشخیص طبی کاربرد زیادی دارد که به صورت خلاصه چگونگی عملکرد این رنگ بدین نحو می باشد که از طریق ساختار اسیدی خود به اجزای بازی سلول ها مثل سیتوپلاسم، گرانولها و غیره متصل می شود و آنها را به رنگ قرمز در می آورد و بخش بازی این رنگ نیز به ساختارهای اسیدی سلول مانند هسته متصل و آن را به رنگ بنفش در می آورد.
نحو کار با رنگ رایت گیمسا
. ابتدا گسترش خون را تهیه کنید.
. سپس صبر کنید تا نمونه روی لام تمیز و استریل خشک شود.
. برای اینکه سئول فیکس شود. همچنین هیچ تغییری نکند به مدت ۵ دقیقه در متانول قرار دهید (رنگ رایت، متانول در ساختار خود دارد و به این مرحله نیازی نیست.)
. بافر قسمات را تهیه کنید. با تناسب درست آن را با این رنگ ترکیب کنید.
. گسترش خونی را تا حداکثر ۴ دقیقه داخل آن به حالت غوطه ور بگذارید
. لام حاوی نمونه ی خونی را با بافر فسفات تا ۳ بار شستشو دهید.
. اجازه دهید کاملا خشک شود.
. حالا می توانید توسط میکروسکوپ آن را بررسی کنید.
دقت تشخیص رنگ رایت گیمسا
دقت تشخیص این رنگ به اندازه کافی بالا و با کیفیت می باشد تا به توان به مطالعه انگل هایی مثل لیشمانیا نیز پرداخت ولی در صورت استفاده از نسبت های نادرست یا شستن ناکافی و غیره دقت آن به شدت پایین می آید و نمی توان رنگ آمیزی خوبی به دست آورد. در هر صورت با اینکه دارای دقت کافی است ولی وضوح خوبی نمی توان از آن انتظار داشت.
محدودیت روش رایت گیمسا
از جمله محدودیت های روش انجام رنگ آمیزی رایت گیمسا این است که در صورت تهیه گسترش ضخیم یا افزایش بیش از حد زمان رنگ آمیزی و یا شستن کم یا خیلی زیاد، اسیدی بودن بیش از حد بافر و غیره محدودیت عملکرد و کاربردی ایجاد می نماید. به همین دلیل در روش انجام محدودیت های خاصی وجود دارد که روش انجام آن را مشکل ساز می کند.
Wright-Giemsa Stain
Polychromatic Romanowsky dyes are a standard in hematology of blood smears and bone marrow. Various sorts of Romanowsky dyes (Giemsa, May-Gruenwald, Leishman, Wright, Jenner and others) contain different ratios of methylene blue used as the cation component (and the reagent-related thiazine dyes, such as azure B) and eosin Y as the anion component. Cation and anion components interaction creates a well-known Romanowsky effect that cannot be achieved if each component is being used individually. Purple color indicates the effect’s presence. Staining intensity depends on the azure B content, as well as azure B to eosin Y ratio, while a few other factors affect the result of staining: working solution pH value, fixation method and dye exposure time. Giemsa solution is used for differentiation of nuclear and/or cytoplasmatic morphology of lymphocytes, monocytes, granulocytes (neutrophils, eosinophils, basophils), thrombocytes and erythrocytes. There are various methods of using the Giemsa solution, and the so-called Pappenheim method is one of the most commonly used ones. The method is essentially the May-Gruenwald Giemsa method combined with the May-Gruenwald solution that stains cytological material (peripheral blood smears, cytodiagnostic puncture aspirates, diarrhea or secretion cells) or hematopoietic organs’ sections. Along with the Pappenheim method, the Giemsa solution is commonly used for chromosomatic aberrations detection in cytogenetics.
Romanowsky stain, for peripheral blood and bone marrow smears. Also used to perform differential white blood cell counts and to study red blood cell morphology. Abnormal granulocyte, lymphocyte or monocyte cell counts may be used to facilitate the diagnosis of diseases such as leukemia or bacterial infections.
Application
When blood films are stained using Wright-Giemsa Stain, the white blood cell nucleus and cytoplasm take on the characteristic blue or pink coloration. The combination of purified eosin and thiazine dyes in the product eliminates inconsistent staining and yields reproducible chromogenic responses.
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.