هماتوکسیلین

هماتوکسیلین Harris کمپانی Bio Optica ایتالیا
رنگ آمیزی پاپانیکولائو، یک روش رنگ آمیزی چند مرحله ای است که توسط دکتر جرج پاپانیکلائو، پدر علم سیتولوژی، توسعه یافته است. محلول هماتوکسیلین یکی از محلول های پاپانیکولائو است که جهت رنگ آمیزی لام های سیتولوژی و پاتولوژی استفاده می شود. این رنگ آمیزی جهت تشخیص انواع سرطان ها مانند سرطان رحم، سرطان دهانه رحم و … استفاده می شود. همچنین از این محلول ها جهت رنگ آمیزی انواع ترشحات و سلول های بدن نیز استفاده می گردد. علاوه بر این هماتوکسیلین در کنار ائوزین در روش رنگ آمیزی هماتوکسیلین – ائوزین H&E نیز مورد استفاده قرار می‌ گیرد. در این روش رنگ آمیزی هسته سلول به رنگ آبی کمرنگ تا بنفش و سیتوپلاسم سلول به رنگ صورتی پر رنگ در می آید. علت این امر آن است که هماتوکسیلین به آنیون هایی مانند گروه های فسفات اسیدهای نوکلئیک متصل می شود و آنها را تقریبا به رنگ آبی در می آورد و ائوزین که دارای بار مثبت است به گروه های آمین اسیدهای آمینه (مانند لیزین و آرژنین) متصل شده و پروتئین ها را به رنگ صورتی در می آورد.

Papanicolaou’s solution Hematoxylin Solution
In hematoxylin-eosin staining (H&E), the most widely used histological staining technique, nuclear staining is achieved using ready-to-use staining solutions, such as Mayer’s hemalum solution. These solutions do not need to be filtrated prior use and the dye is oxidized in a controlled manner, which renders the results robust and allows a brilliant differentiation of the stained structures. Counterstaining of i.e. for proteins, collagen, keratin, intercellular substances.

Application
For the preparation of cyto-histological samples for optical microscopy. Nuclear staining solution. General purpose nuclear stain, progressive type. Used with hematoxylin and eosin staining.

General description
Used as a counterstain for procedures such as immunohistochemistry or laser microdissection

Principle:
In Harris’ Hematoxylin the active chemical species is the complex formed by hematein (hematoxylin oxidized by potassium iodate) with potassium aluminum sulfate. This complex has a positive charge and is therefore able to bind to anionic sites present in the chromatin histone proteins.

Method:
1) Sections to distilled water
2) Harris’ hematoxylin 3 minutes
3) Colour change in tap water (or Scott’s water for 1 minutes) 5 minutes
4) 1% eosin (water solution) 5 minutes
5) Tap water 5 minutes
6) Dehydrate
7) Clearing agent and mount

Results:
Nuclei…………………………Purple-blue
Cytoplasm……………………Pink-red