توضیحات
رنگ آمیزی رودانین (رنگ آمیزی مس یا رنگ آمیزی کوپر) برای بافت
بیماری ویلسون (Wilson disease) یک بیماری نادر ژنتیکی است که در آن مقادیر اضافی مس در برخی اندام های بدن به ویژه کبد، مغز و قرنیه چشم انباشته می شود. این بیماری پیشرونده است و در صورت عدم درمان، ممکن است باعث بیماری کبد، اختلال در عملکرد سیستم عصبی مرکزی و مرگ شود. رنگ آمیزی رودانین (رنگ آمیزی مس یا رنگ آمیزی کوپر) تکنیکی است که در آزمایشگاه های هیستوپاتولوژی برای تشخیص مقادیر اضافی مس در بافت و تشخیص بیماری ویلسون مورد استفاده قرار می گیرد. در این مطلب قصد داریم تا تکنیک رنگ آمیزی رودانین (رنگ آمیزی مس یا رنگ آمیزی کوپر)، مواد و محلول های مورد استفاده در آن و همچنین نتایج حاصل از این تکنیک رنگ‌آمیزی را مرور کنیم.
کاربرد تشخیصی رنگ آمیزی رودانین (رنگ آمیزی مس یا رنگ آمیزی کوپر)
همانطور که در قسمت مقدمه نیز گفته شد، تکنیک رنگ آمیزی رودانین (رنگ آمیزی مس یا رنگ آمیزی کوپر) جهت بررسی میزان مسِ انباشته شده در اندام ها مورد استفاده قرار می گیرد. نتیجه مثبت بیانگر ابتلا به بیماری ویلسون است. دقت داشته باشید که نتیجه منفی رنگ آمیزی، ابتلا به بیماری ویلسون را در فرد رد نمی‌کند و نیاز است آزمایشات دیگری نیز برای تایید تشخیص انجام شود.
مواد و محلول‌های مورد نیاز رنگ آمیزی رودانین (رنگ آمیزی مس یا رنگ آمیزی کوپر)
۱. فیکساتیو: بافر فرمالین خنثی ۱۰%
۲. استوک رودانین % ۰/۴ :
توجه داشته باشید که این محلول باید تازه تهیه شود.
۳ – رودانین (p-dimethylaminobenzylidene) —————- ۰/۰۲۴ گرم
الکل خالص —————————————————– ۶/۰ میلی لیتر
۴. محلول استات سدیم ۱٪
سدیم استات تری هیدرات ————————————-۱/۰ گرم
آب مقطر ——————————————————– ۱۰۰/۰ میلی لیتر
۵. محلول رودانین (برای کار)
محلول رودانین (استوک) ————————————-۵/۰ میلی لیتر
سدیم استات ۱٪——————————————— ۴۵/۰ میلی لیتر
محلول رودانین را از کاغذ فیلتر به قطر ۷۰ میلی متر در سدیم استات ۱٪ فیلتر کنید
۶. سدیم بورات ۰/۴%
سدیم بورات (Na2B4O7 ∙ ۱۰ H2O) ————————–۰/۴ گرم
آب مقطر ——————————————————۱۰۰/۰ میلی لیتر
مراحل رنگ آمیزی رودانین(رنگ آمیزی مس یا رنگ آمیزی کوپر)
۱. از لام کنترل مثبت استفاده کنید.
۲. مراحل پارافین زدایی و هیدراسیون با استفاده از آب مقطر را انجام دهید.
۳. یک جار رنگ آمیزی حاوی محلول رودانین را بردارید. لام ها را درون جار قرار داده و درپوش آن را ببندید. توجه داشته باشید که درپوش شل باشد. جار را به مدت ۳۰ ثانیه درون ماکروویو ۳۶۰ وات قرار دهید.
۴. جار حاوی لام را از درون آونِ ماکروویو بیرون آورده و حدود ۱۵ ثانیه تکان دهید.
۵. جار را به ماکروویو برگردانید و برای مدت ۳۵ ثانیه درون ماکروویو ۳۶۰ وات قرار دهید.
۶. مجددا جار را از درون آونِ ماکروویو خارج کنید و حدود ۱۵ ثانیه تکان دهید.
۷. اجازه دهید لام ها به مدت ۵ دقیقه در این محلول داغ، که دمای آن حدودا ۸۰ درجه سانتیگراد است، بمانند.
۸. جار را به مدت ۱۰ ثانیه درون ماکروویو ۳۶۰ وات قرار دهید. سپس مجددا آن را خارج کرده و حدود ۱۵ ثانیه تکان دهید و اجازه دهید لام ها به مدت ۵ دقیقه درون محلول باقی بمانند.
۹. لام را ۶ مرتبه با آب مقطر آبکشی کنید.
۱۰. لام را به مدت ۱۰ ثانیه در هماتوکسیلین اسیدی Lillie-Mayer قرار دهید. این محلول به صورت تجاری در دسترس است.
۱۱. لام را ۲ مرتبه با آب مقطر آبکشی کنید.
۱۲. سپس لام را به مدت ۱۵ ثانیه درون هماتوکسلین آبی و سدیم بورات قرار دهید.
۱۳. لام را ۴ مرتبه با آب مقطر آبکشی کنید.
نتایج رنگ آمیزی رودانین
گرانول های داخل سیتوپلاسمی به رنگ قرمز روشن یا مسی
هسته ها به رنگ آبی
جمع بندی
تکنیک های رنگ آمیزی در آزمایشگاه جهت شناسایی بیماری ها و اختلالات مرتبط با سلامتی بسیار کاربردی هستند. جهت بررسی اختلالات مختلف معمولا از تکنیک های رنگ آمیزی متفاوتی نیز استفاده می شود. در این مطلب روش رنگ آمیزی رودانین (رنگ آمیزی مس یا رنگ آمیزی کوپر) و محلول های مورد استفاده در آن را توضیح دادیم که جهت بررسی مقادیر اضافی مس در بافت‌ها و اندام های بدن مورد استفاده قرار می‌گیرد.
نکته ی حائز اهمیت این است که هریک از تکنیک های رنگ آمیزی مورد استفاده در آزمایشگاه ها ممکن است به روش‌های مختلفی انجام شوند
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.